RECEIVING AND OPTIMIZATION OF CULTIVATION CONDITIONS OF ENRICHED CULTURES OF CELLULOTIC MICROORGANISMS FOR COMPOSTING

2018;
: 80-87
1
Lviv Polytechnic National University
2
National University Lviv Polytechnic
3
Lviv Polytechnic National University
4
Stepan Gzhytskyi National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies Lviv
5
Lviv Polytechnic National University

The problem of utilization of solid cellulosic wastes of agriculture (straw, cornstarch, sunflower husks, etc.), woodworking, pulp - paper industry (branches, sawdust, crust of trees, sulfite alkali ash), municipal waste, which  consist 40-50% of plant biomass , especially from fallen leaves, contaminated with gas-man-made emissions, has become critical in the urban and agricultural sectors.

Fallen leaves vary in chemical composition and differ in the speed of their degradation - mineralization. Fermentolysis of these substrates by cellulolytic enzymes can be used to accelerate mineralization. The method of recycling cellulose waste with using of cellulolytic microorganisms biomass can be promising.

Natural substrates that contain cellulose with different degrees of degradation were selected for research.  The composition of the components in the substrates varied in the range of: 15-70% cellulose, 10-85% hemicellulose, 0-70% lignin.

The enriched cultures of aerobic cellulolytic microorganisms (bacteria and fungi) were cultured on a liquid and solid Hutchinson-Clayton medium with the purpose to receive  separate colonies of cellulolytic microorganisms from natural substrates.

The searching of producers and the allocation of enriched cultures of aerobic cellulolytic bacteria and fungi with high cellulase activity and the production of enzyme preparations on their basis is an actual task for increasing of composting and bio-utilization.

The received enriched cultures are the initial stage of obtaining pure cultures of microorganisms from natural substrates. The destruction of paper filters was observed in all samples that indicate the presence of cellulolytic microorganisms.

As a result of cultivating biomass, 9 strains of bacteria and 8 strains of fungi that are capable to enzymatically decomposing cellulose are isolated. 2 strains of bacteria and 2 strains of fungi were selected for further experiments. The ability to utilize various sources of carbon nutrition, such as: CMC (carboxymethylcellulose), fallen leaves, sawdust, shavings, crushed filter paper, cotton wool, hay were investigated.

Based on our experimental results and the literature data on the using of CMC as marker for determination of the cellulase activity, we have carried out further screening of active cellulolytic bacteria and fungi on this substrate.

For the preliminary identification of isolated cultures of cellulolytic bacteria and fungi, the detection of their morphological characteristics was made by microscopic preparations.

The accumulation cultures of aerobic cellulolytic microorganisms from cellulosic substrates of natural origin: soils of different origins, fallen leaves and wood differing in degree of natural degradation, were obtained. Separate isolates of cellulolytic bacteria and fungi were isolated and optimization of conditions of their cultivation was carried out.

1. Тверді побутові відходи в Україні: потенціал розвитку сценарії розвитку галузі поводження
з твердими побутовими відходами. – Підсумковий звіт Міжнародної фінансової корпорації (IFC,
Група Світового банку) – 2018. 2. Гапоненко Г. М., Хоменко І. О. / Проблеми утилізації сміття в
Україні // Збірник тез Міжнародної наук.-практ. конф. студентів, аспірантів і молодих вчених
“Юність науки – 2017: соціально-економічні та гуманітарні аспекти розвитку суспільства”
(м. Чернігів, 26–27 квітня 2017 р.): ЧНТУ. – Чернігів: Черніг. нац. технол. ун-т, 2017. – С. 17–18.
3. Скип О. С., Швед О. В., Буцяк В. И. Перспективы альтернативности субстратов опавших
листьев в вермикультвировании // Technological aspect of modern agricultural production and
environmental protection/proceedings XIII International scientific-applied conference. daRostim. –
Алмати Казак. ун-т, 2017. – С. 102–103. 4. Manczarski P. Kompostowanie odpadów komunalnych //
Referat na Forum Technologii Ochrony Środowiska . POLEKO. – 2007, UP – 1–16 s. 5. Пащенко І.,
Палюх Г., Червецова В., Заярнюк Н., Швед О., Новіков В. Оптимізація умов культивування
нагромаджувальної культури целюлолітичних мікроорганізмів // Матеріали Міжнародн. наук.-
практ. інтернет-конференції “Біотехнологія : досвід, традиції та інновації, присвячена 50-ти
річчу започаткування біотехнологічної освіти в Україні (14–15 грудня 2016). – К: НУХТ, 2016. –
С. 350–356. 6. Билай В. И., Билай Т. И., Мусич Е. Г. Трансформация целюлози грибами. – К.: Наук.
думка, 1982. – 296 с. 7. Сэги Й. Методы почвенной микробиологии. – М.: Колос, 1983. – 295 с.
8. Скомаровский А. А., Марков А. В., Гусаков А. В. и др. Новые целлюлазы для высокоэффективного
гидролиза лигноцеллюлозной биомассы // Прикл. биохим. мик робиол. – 2006. – Т. 42, № 6. – С. 674–
680. 9. Даниляк Н. И., Семичевский В. Д., Дудченко Л. Г., Трутнева И. А. Ферментные системы
высших базидомицетов. – К.: Наука, 1989. – 280 с. 10. Синицын А. П., Черноглазов В. М.,
Гусаков А. В. Методы изучения и свойства целлюлозолитических ферментов // Итоги науки и
техники. Сер. Биотехнология – 1993. – Т. 25. – 152 с. 11. Синицын А. П., Гусаков А. В., Черно-
глазов В. М. Биоконверсия лигноцеллюлозных материалов: учеб. пособие. – М. : Изд-во МГУ, 1995. –
224 с. 12. Патика В. П., Копилов Є. П., Скуловато О. В. Целюлозолітична активність грунтового
гриба Chaetomium globusum // Вісник Уманського національного університету садівництва.
“Мікробіологія”. – 2016. – № 1. – С. 27– 30.